제품소개.
CHO (Chinese Hamster Ovary)
ResidualQSearch™ Plus CHO DNA Quantitation Kit
실시간 중합효소 연쇄반응(real-time PCR 또는 qPCR)을 이용하여 의약품 생산 과정에서 숙주(Host Cell) 유래 잔류 DNA를 정량 할 수 있는 제품입니다. Chinese Hamster Ovary cell은 단백질,항체, 백신 등 바이오의약품의 생산에서 가장 널리 사용되고있는 mammalian cell line입니다.
CHOP-100
제품종류
| Cat. No | 규격 | 소비자가 |
| CHOP-100 | 100 Tests | 견적요청하기→ |
제품정보
특징
- 한국 식약처(Korea MFDS), 세계보건기구(WHO), 유럽 약전(EP), 일본 약전(JP) 기준에 적합
- 세포배양유래의약품의 숙주유래 잔류 DNA 정량에 사용
- Hydrolysis probe를 이용한 real-time PCR(qPCR) 기술 적용
(FAM labeled probe : CHO DNA, HEX labeled probe : IAC) - Digital PCR을 이용해 정확하게 정량된 CHO gDNA standard 제품 내 포함
- 검출한계(Limit of Detection) : 0.3 fg/reaction
- 정량한계(Limit of Quantitation) : 3 fg/reaction
- UDG 시스템 적용 : 캐리-오버 오염(Carry-over contamination)의 방지
결과
Amplification Result and Standard Curve
STD1: 3 ng/reaction
STD2: 0.3 ng/reaction
STD3: 30 pg/reaction
STD4: 3 pg/rection
STD5: 0.3 pg/reaction
STD6: 30 fg/reaction
STD7: 3 fg/reaction
ResidualQSearch™ Plus CHO DNA Quantitation Kit 를 사용하여 3 ng/reaction 부터 serial dilution을 통해 3 fg/reaction 까지 총 7 point 실험한 결과. 3 fg 이상의 잔류 DNA를 정량 가능함을 확인했다.
지원
Certificates of analysis
제품 FAQ
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Q
Standard curve를 위해 몇 개의 농도가 적절한가요?A
USP<509>에 따르면 정량할 시료의 Ct값이 standard curve 내에 존재하는 것만 측정 가능합니다. 따라서, 정량할 시료의 농도가 standard curve에 포함되도록 농도를 정하시면 됩니다. ResidaulQSearch™ Plus CHO DNA Quantitation Kit 제품 내에 포함된 Quantitative CHO Genomic DNA를 사용하여 3ng/reaction(STD1) ~ 3fg/reaction(STD7) 까지 측정할 수 있습니다.
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Q
바이오의약품의 생산 및 개발과정에 사용할수 있나요?A
네. 가능합니다. 이 제품은 검출한계(Limit of Detection)가 0.3fg/reaction, 정량한계(Limit of Quantitation)가 3fg/reaction 입니다. USP<509>에서 제시한 모든 기준을 만족하여 정확한 정량이 가능합니다. CHO cell을 이용한 바이오의약품 연구의 공정개발, 품질관리,세포주 선별 등 전반적인 과정에서 사용할 수 있습니다. 보다 자세한 내용 안내가 필요하시다면 [온라인 문의] 게시판을 통해 문의하시거나, 본사로 문의해 주시기 바랍니다.
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Q
Real-Time PCR 장비에서 채널 선택을 어떻게 해야하나요?A
해당 제품은 Hydrolysis probe 방식으로 well 당 2채널(FAM, HEX) 모두 선택하여 실험합니다.
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Q
사용하는 Real-Time PCR 장비에 HEX dye가 없는데 어떻게 해야 하나요?A
보유 장비에 HEX dye가 없는 경우 VIC dye로 대체할 수 있습니다. 또한 해당기기에 HEX dye 파장을 설치 할 수 있는 HEX plate 제품이 있습니다. 제품 구매 및 사용 방법 등의 문의는 [온라인문의] 게시판을 통해 문의하시거나, 본사로 문의해 주시기 바랍니다.
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Q
이전 실험의 PCR 산물로 인한 위양성이 뜨는 것 같은데 해결 방법이 있나요?(Carryover contamination 해결방법)A
해당 제품은 2X qPCR master mix에 dTTP 대신 dUTP가 포함되어 UDG 시스템이 적용되었으며, 아래와 같은 내용으로 해결이 가능합니다.
1) dUTP가 포함된 PCR 산물(amplicon)에 UNG(Uracil-N-glycosylase, 키트에는 불포함)를 처리
2) UNG는 dUTP가 포함된 DNA 부분의 uracil-glycosidic 결합을 hydrolysis하여 PCR산물의 재증폭 방지
3) UDG 시스템은 dTTP가 포함된 주형 DNA는 완전하게 유지되면서 캐리-오버 오염(carry-over contamination)을 방지(UDG=UNG)
