(주)셀세이프

제품 FAQ

• Q
  이 제품을 사용하여 식품의약품안전처의 인허가를 받는 것이 가능한가요?
  A

  네. 가능합니다. 이 제품은 생산용(부정시험용) 세포주에 적합한 제품으로, 민감도가 1~10Copies/Reaction 입니다. 식품의약품안전처에서는 10CFU/mL이하를 검출할 수 있어야 한다는 기준을 제시하고 있기 때문에 세포치료제, 유전자치료제 등의 세포가 사용되는 바이오의약품 품질관리에 적절합니다. 다만, 바이오의약품의 임상단계부터는 Validation을 필수적으로 요구할 수 있으니 보다 자세한 내용 안내가 필요하시다면 '셀세이프 홈페이지 -> 고객지원 -> Contact us -> 온라인문의' 게시판을 통해 문의하시거나, 본사로 문의해 주시기 바랍니다.

• Q
  일반 버전과 EP 버전의 차이는 무엇인가요?
  A

  Prep Control의 유무의 차이입니다. 일반 버전은 Primer 내에 내부대조군(IAC)이 포함되어 있어 PCR 정상 반응 여부를 확인할 수 있습니다. 반면에 EP 버전은 별도로 구성된 내부대조군(IAC)을 DNA Prep 시 추가하여 PCR 정상 반응 뿐만 아니라 DNA Prep의 유효성도 동시에 확인할 수 있습니다.

• Q
  검출 제품에 따라 민감도 단위(CFU or Copy 등)가 다른데 어떻게 비교해야하나요?
  A

  1CFU의 균 내 genomic DNA copy 수는 마이코플라스마 종, 배양 조건에 따라 다릅니다. Kit 검출한계가 동일한 10CFU/mL라 하더라도 CFU에 포함된 copy가 다르기 때문에 GC/CFU ratio가 10인지, 100인지, 1000인지에따라 실질적인 검출한계는 달라질 수 있습니다. 이로 인한 혼동을 방지하고자 자사 Kit는 정확한 copy수로 민감도를 확인하고 있습니다.

• Q
  마이코플라스마 밴드만 보이고 내부대조군(IAC) 밴드가 보이지 않는 이유가 무엇인가요?
  A

  마이코플라스마 오염이 심한 경우, IAC 밴드가 보이지 않을 수도 있습니다. 두 개의 밴드가 경쟁적관계로 설계된 제품으로, 마이코플라스마 밴드가 진하게 나타날수록 내부대조군(IAC)밴드가 연하게 나타나게 됩니다. 따라서, 마이코플라스마 밴드만 나타나는 경우에도 PCR이 정상 진행되었다고 판단하시면 됩니다.

• Q
  Positive Control DNA 밴드가 보이지 않는 이유는 무엇인가요?
  A

  Positive Control 증폭은 정상적인 시험 진행 여부를 확인하는 역할이기에 항상 2개의 밴드가 증폭되어야 합니다. 정상적인 PCR반응이 이뤄졌다 하더라도, Positive Control DNA를 Vortexing하거나, 상온에 장시간 노출하는 경우 등은 DNA가 분해되어 정상적인 밴드가 나타나지 않을 수 있습니다. Positive Control DNA를 여러번 냉/해동하여 이용하는 경우에는 안정적인 시험을 위해 소분하여 사용하는 것을 권장하고 있습니다.

• Q
  샘플에서 밴드가 하나도 보이지 않습니다. 이유가 무엇인가요?
  A

  세포배양액에 PCR 저해 물질(높은 EDTA농도, 높은 FBS 농도, 단백질 등)이 있는 경우 PCR이 정상적으로 진행되지 않습니다. Wash 과정을 추가하시거나 DNA prep Kit를 이용하여 샘플 준비 하시는 것을 권장드립니다.

• Q
  이전 실험의 PCR 산물로 인한 위양성이 뜨는 것 같은데 해결 방법이 있나요?(Carry-over contamination 해결방법)
  A

  해당 제품은 2X PCR master mix에 dTTP 대신 dUTP가 포함되어 UDG 시스템이 적용되었으며, 아래와 같은 내용으로 해결이 가능합니다.

  1) dUTP가 포함된 PCR 산물(amplicon)에 UNG(Uracil-N-glycosylase, 키트에는 불포함)를 처리
  2) UNG는 dUTP가 포함된 DNA 부분의 uracil-glycosidic 결합을 hydrolysis하여 PCR산물의 재증폭 방지
  3) UDG 시스템은 dTTP가 포함된 주형 DNA는 완전하게 유지되면서 캐리-오버 오염(carry-over contamination)을 방지(UDG=UNG)